Pokyny pro montáž na montáž
Než začnete proces přípravy snímku, ujistěte se, že jste shromáždili všechny potřebné materiály, včetně snímků, skluzů, kapátka nebo pipetů a všech chemikálií nebo skvrn, které chcete využít.
S nimiž budete pracovat dva primární typy snímků:
1. Standardní skluzavka plochého skla.
2.. Deprese nebo dobře skluzavka, která má malou studnu nebo odsazení ve svém středu určeném k držení kapky vody nebo kapalné látky. Ty jsou obvykle dražší a běžně se používají bez krycího skluzu.
Standardní sklíčka mohou být vyrobena z plastu nebo skla, měřící 1 x 3 palce (25 x 75 mm) o velikosti a 1 až 1,2 mm v tloušťce.
U mokrých skluzavek je nezbytný krycí skluz nebo krycí sklo. Jedná se o ultra tenký, čtvercový kus skla (nebo plastu), který je pečlivě umístěn nad kapkou vzorku. Bez krytu by povrchové napětí způsobilo, že kapička tvoří tvar kupole. Kryt čísí toto napětí a zajišťuje, že vzorek leží plochý pro přesné vyšetření s minimálním zaostřením. Navíc krytí působí jako záruka, což brání objektivu objektivu v narušení poklesu vzorku.
Míry mikroskopu
Míra mikroskopu odkazují na metody používané k zabezpečení sklíčků nebo vzorků pro pozorování. Existují především čtyři typy:
1. Slide Mounts:Jedná se o nejběžnější typ a zahrnuje umístění vzorku na plochý skleněný sklíčko, často pomocí montážního média (jako kapalina nebo gel), který jej drží na místě. Poté se přidá krycí skluz, který chrání vzorek a poskytne rovný povrch pro prohlížení.
2. Dutiny nebo pohoří:Tyto sklíčka mají ve středu malou studnu nebo depresi, navržená tak, aby držela kapku kapaliny, jako je voda nebo specializovaná montážní tekutina. Používají se při práci se vzorky, které vyžadují ponoření do kapaliny.
3. dočasné úchyty:Tyto úchyty nejsou určeny pro dlouhodobé skladování nebo pozorování. Zahrnují jednoduché a rychlé metody, jako je umístění vzorku na sklíčko s kapkou vody. Často se používají k pozorování živých organismů nebo časově citlivých vzorků.
4. Trvalé úchyty:Jsou navrženy pro dlouhodobé skladování a pozorování. Zahrnují složitější postupy, včetně použití specializovaných montážních médií, které v průběhu času ztvrdne, a zapouzdřující vzorek do transparentního média. Tento typ držáku se často používá pro vzdělávací snímky a vědecký výzkum.
Každý typ držáku má své specifické aplikace a je vybrán na základě povahy vzorku a účelu pozorování.
Čtyři běžné způsoby, jak namontovat skluz mikroskopu
Existuje několik běžných metod, jak namontovat sklíčko mikroskopu, v závislosti na typu vzorku a účelu pozorování. Zde jsou čtyři běžné způsoby, jak namontovat mikroskop:
Suché montáž:
Postup: V této metodě je vzorek umístěn přímo na čistý suchý mikroskop. Často se používá pro vzorky, které nevyžadují další vlhkost nebo ponoření do kapaliny.
Aplikace: Suché montáž je vhodné pro pozorování pevných vzorků, jako jsou součásti rostlin, vlasy nebo minerály.
Mokré montáž:
Postup: Na sklíčka je umístěna malá kapka kapaliny (obvykle voda nebo specializovaná montážní kapalina) a do této kapky se potom přidá vzorek. Krycí skluz je jemně umístěn přes vzorek, aby se zabránilo vyschnutí a zkreslení.
Aplikace: Mokré úchyty se používají pro pozorování živých organismů, buněk nebo vzorků, které vyžadují ponoření do kapaliny.
Montáž squash:
Postup: Tato technika zahrnuje umístění vzorku na sklíčka a poté je jemně stisknutím skluzem krytu nebo jiným skluzavkou, aby jej zplošťoval. To se běžně používá pro měkké tkáně nebo jemné části rostlin k vytvoření tenké, průhledné vrstvy pro pozorování.
Aplikace: Konkurence squash se používají pro zkoumání tkání, zejména v biologii rostlin.
Montáž na nátěr:
Postup: Malé množství vzorku (obvykle kapalina nebo polofikovaná látka) se šíří tenké a rovnoměrně přes sklíčko a často pomocí okraje jiného skluzu. Potom se dovolí vzduchu nebo může být opravena chemickým činidlem.
Aplikace: Úchyty nátěru se běžně používají pro pozorování mikroorganismů, jako jsou bakterie nebo pro přípravu krevních nátěrů na mikroskopii.
Tyto metody zajišťují různé typy vzorků a jejich specifické požadavky na pozorování. Výběr montážní techniky závisí na faktorech, jako je povaha vzorku, účel pozorování a požadovanou úroveň detailů a jasnosti.
Skvrny mikroskopu
Skvrny mikroskopu, známé také jako biologické skvrny nebo barviva, jsou látky používané v mikroskopii ke zvýšení kontrastu a viditelnosti biologických vzorků. Pracují selektivně vazbou na specifické buněčné složky, jako jsou proteiny, nukleové kyseliny nebo lipidy, což umožňuje snadnější vizualizaci a diferenciaci buněčných struktur. Zde jsou některé běžné typy skvrn mikroskopu:
1. Hematoxylin a eosin (H&E):
Typ: Kombinovaná skvrna.
Použití: Jeden z nejpoužívanějších skvrn v histologii, hematoxylin skvrny buněčné jádra modro-fialové, zatímco eosinové skvrny cytoplazmy a některé extracelulární struktury růžové.
2. methylenově modrá:
Typ: Základní barvivo.
Použití: Skvrnná buněčná jádra modrá. Obvykle se používá pro obecné cytologické a mikrobiologické studie.
3. Giemsa:
Typ: Kombinovaná skvrna.
Použití: Používá se pro barvení krvinek a rozlišuje jaderné a cytoplazmatické složky v řadě barev, což umožňuje identifikaci různých typů buněk.
4. Gramová skvrna:
Typ: Kombinovaná skvrna.
Použití: Rozlišuje mezi dvěma hlavními kategoriemi bakterií: gram-pozitivní (které si zachovávají krystalickou fialovou skvrnu) a gram-negativní (které zabírají kontrastain Safranin).
5. Wright's Stain:
Typ: Kombinovaná skvrna.
Použití: Tato skvrna se primárně používá pro krevní nátěry, umožňuje diferenciaci typů krevních buněk a identifikaci abnormalit.
6. Lugolův jód:
Typ: skvrna na bázi jódu.
Použití: Používá se ve spojení s Gramovým jódem, lze jej použít ke zvýšení kontrastu určitých buněčných struktur.
7. Oil Red O:
Typ: Lipofilní barvivo.
Použití: váže se konkrétně na lipidy, což je užitečné pro barvení struktur, jako jsou tukové kapičky v buňkách.
8. Periodická kyselina-Schiff (PAS):
Typ: skvrna založená na chemické reakci.
Použití: Reaguje s uhlohydráty, zvýrazňuje struktury jako glykogen, muciny a další glykoproteiny.
9. Toluidin Blue:
Typ: Základní barvivo.
Použití: skvrny kyselé složky v buňkách a tkáních, včetně granulí žírných buněk a nukleových kyselin.
10. Safranin:
Typ: Základní barvivo.
Použití: Používá se jako kontrastáin při barvení gramu na barevné gramnegativní bakterie.
Toto je jen několik příkladů a existuje mnoho dalších specializovaných skvrn používaných pro specifické účely v mikroskopii, jako jsou speciální skvrny pro pojivové tkáně, nervová vlákna nebo specifické buněčné struktury. Volba skvrn závisí na typu vzorku a informacích potřebných z mikroskopického vyšetření.
Kroky barvení mikroskopu
1. Začněte přípravou mokrých montážních skluzavek a umístěním vzorku na čistý mikroskop.
2. Pomocí očního kapátku nebo pipety opatrně shromážďte kapičku vybrané skvrny.
3. Umístěte tuto kapku skvrny na vnější okraj krycího skluzu a zajistěte, aby kontaktovala okraj skluzu.
4. Chcete -li usnadnit rovnoměrné rozložení skvrny, umístěte kus ubrousku nebo papírového ručníku podél opačné strany krycího skluzu a pevně ji přitlačte na okraj.
5. Pokud je to nutné, použijte další pokles skvrn, abyste zaručili úplné pokrytí vašeho vzorku.
6. Váš snímek je nyní plně připraven na pozorování pod mikroskopem.
